经过了两年的淬炼，D300终于改款，进化至D300s。D300s在原有基础上性能进一步提升，并且加入了高清录像功能。D300s最新促销套餐为：D300s（含18-200 VR镜头）+4G高速卡+1.5米三脚架+国产备用电池+贴膜+多合一高速读卡器+清洁套装+单反包+肯高UV镜+发票=17888元。

众所周知，D300已是Nikon DX系统中最强大的机器，这导致可以增加的部份并不多，D300s大部份的功能仍是架构在D300之上的升级。首先D300s加入了1280×720的视频录制能力，但仍然是AVI（Motion JPEG）形式24fps的规格。连拍速度上升至7张/秒，比D300多了一张(未加手柄时)。

D300s的存储介质除去CF卡之外，也支持SDHC卡存储。D-Lighting功能的设定更加详细。机身背面新增加的Info按钮方便查看设置信息。Live view也增设了单独的按钮，不再以旋转拨盘开启。此外，D300s的重量相比较D300有轻微的增加，在对焦速度和暗部对焦精度上，D300s也有提升。除此之外，D300和D300s的区别就几乎没有了。

如果从视频拍摄的角度来看，再与D90比较的话，D300s虽然仍是1280×720P，24fps的规格，但是新增加了可以设定动画的起点和终点的简易编辑功能，以及外接立体声麦克风对应的外部麦克风接口。